olink蛋白組技術(shù)服務(wù)

olink蛋白組技術(shù)服務(wù)

一、核心原理：PEA 技術(shù)

1.      抗體對 + DNA 標(biāo)簽：每個目標(biāo)蛋白對應(yīng)一對抗體，分別偶聯(lián)互補的單鏈 DNA（各帶蛋白特異條形碼）。

2.      雙識別 + 鄰位雜交：只有兩個抗體同時結(jié)合同一蛋白，兩條 DNA 才會靠近、雜交成雙鏈。

3.      延伸 + 擴增 + 定量：DNA 聚合酶延伸→PCR 擴增→qPCR/NGS 讀數(shù)；信號強度 = 蛋白濃度。

關(guān)鍵優(yōu)勢：非特異性結(jié)合不會讓 DNA 靠近，幾乎無背景，特異性可達(dá) 99.7%。

二、技術(shù)特點（為什么選 Olink？）

超微量：1–6 μL血清 / 血漿即可（比傳統(tǒng) ELISA 少 100 倍）。

超高靈敏：檢測下限 fg/mL 級，能抓到極低豐度的細(xì)胞因子、信號蛋白Olink。

超寬動態(tài)：10 個數(shù)量級，同時覆蓋高豐度（白蛋白）與低豐度（炎癥因子）Olink。

高通量：一次可測 96–384 樣本；蛋白數(shù)：Target（48/96）、Explore（384）、Reveal（~1000）。

高重現(xiàn)：CV <10%（板內(nèi)）、<20%（板間），適合大隊列（上萬例）。

樣本類型：血清、血漿、腦脊液、尿液、細(xì)胞上清、組織裂解液。

三、主流產(chǎn)品 Panel（怎么選？）

Target 96/48：qPCR 檢測，48/96 蛋白，驗證階段、小隊列、低預(yù)算。

Explore 384：NGS 檢測，384 蛋白，覆蓋炎癥、免疫、腫瘤、代謝，常用。

Reveal（新品，2026）：NGS，~1000 蛋白，全面炎癥 / 免疫 + 疾病相關(guān) + cis-pQTL 蛋白，發(fā)現(xiàn)級Olink。

Explore HT：超高通量，384 蛋白 ×384 樣本，超大隊列（如 UK Biobank）。

四、實驗流程（5 步出結(jié)果）

1.      樣本準(zhǔn)備：血清 / 血漿，1 μL 足夠。

2.      PEA 反應(yīng)：加抗體對→孵育結(jié)合→DNA 雜交延伸。

3.      PCR 擴增：生成帶條形碼的擴增子。

4.      NGS/qPCR 檢測：測序或熒光定量，得到每個蛋白的讀數(shù)。

5.      數(shù)據(jù)分析：標(biāo)準(zhǔn)化→差異蛋白→通路富集→ biomarker 篩選。

五、Olink vs 質(zhì)譜（LC-MS）vs 傳統(tǒng) ELISA

Olink：靶向、超高靈敏、超微量、高通量、低 CV；適合血液 / 體液、大隊列、低豐度蛋白。

LC-MS：無偏、全蛋白組、可發(fā)現(xiàn)新蛋白；但靈敏度低、CV 高、需大量樣本；適合組織 / 細(xì)胞、發(fā)現(xiàn)階段。

ELISA：單指標(biāo)、低通量、高成本；適合少數(shù)指標(biāo)驗證。

一句話：Olink 是血液蛋白組的 “黃金標(biāo)準(zhǔn)"，質(zhì)譜是組織蛋白組的 “金標(biāo)準(zhǔn)"，二者互補。

六、應(yīng)用場景（適合做什么？）

疾病 Biomarker 篩選：腫瘤早篩、自身免疫病、神經(jīng)退行性疾病（如阿爾茨海默病）、心血管病；AUC 可達(dá) 0.9+。

大隊列流行病學(xué)：UK Biobank、中國慢性病隊列，上萬樣本的蛋白組掃描Olink。

藥物研發(fā)：靶點驗證、藥效監(jiān)測、耐藥機制、pQTL 研究（蛋白數(shù)量性狀位點）Olink。

多組學(xué)整合：Olink（蛋白）+ 基因組 + 轉(zhuǎn)錄組 + 代謝組，構(gòu)建疾病分子網(wǎng)絡(luò)。

免疫與炎癥研究：細(xì)胞因子、趨化因子、免疫檢查點蛋白的原位 / 循環(huán)水平分析Olink。

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