眼科動物模型構建

一、常見眼科動物模型構建分類

1. 角膜疾病模型

（1）角膜損傷/潰瘍模型

• 動物：大鼠（SD/Wistar）、小鼠（C57BL/6）、兔（新西蘭兔）。

• 建模方法：

• 堿燒傷：用NaOH（0.1–1 M）濾紙片貼附角膜10–30秒。

• 酸燒傷：H?SO?或HCl處理。

• 機械刮傷：用角膜鏟或針頭刮除角膜上皮層（可控制深度）。

• 化學燒傷：

• 感染性角膜炎：接種細菌（如銅綠假單胞菌）或真菌（如白色念珠菌）。

• 檢測指標：

• 角膜混濁評分（0–4級）、熒光s鈉染色（上皮缺損面積）、組織病理（炎癥細胞浸潤）。

（2）干眼癥模型

• 動物：小鼠、兔。

• 建模方法：

• 藥物誘導：皮下注射東莨菪堿（0.5 mg/100 g，每日1次，持續7–14天）。

• 環境誘導：低濕度（≤30%）+ 氣流暴露（如風扇直吹）。

• 自身免疫模型：如MRL/lpr小鼠（自發干燥綜合征）。

• 檢測指標：

• 淚液分泌量（Schirmer試驗）、角膜熒光素染色、杯狀細胞計數（結膜活檢）。

2. 青光眼模型

（1）高眼壓模型

• 動物：大鼠、小鼠、兔、靈長類（如獼猴）。

• 建模方法：

• 激光誘導：氬激光光凝房角（需前房注射印度墨汁增強吸收）。

• 微球注射：前房注射聚苯乙烯微球（10 μm，阻塞小梁網）。

• 激素誘導：地s米松滴y液（4–6周，適用于兔）。

• 檢測指標：

• 眼壓測量（Tonolab或Goldmann壓平眼壓計）、視網膜神經節細胞計數（Brn3a免疫染色）、視神經軸突損傷（電鏡）。

（2）視神經損傷模型（模擬青光眼性視神j病變）

• 方法：

• 視神經鉗夾：手術暴露并夾持視神經（大鼠常用）。

• NMDA誘導：玻璃體內注射NMDA（興奮性毒性導致RGC死亡）。

3. 白內障模型

• 動物：大鼠、小鼠、兔。

• 建模方法：

• 亞硒s鈉（Na?SeO?）皮下注射（新生大鼠，15 μmol/kg）。

• 糖皮質激素（地s米松）長期滴眼。

• 藥物誘導：

• 紫外線誘導：UV-B照射（每日5–10分鐘，持續數周）。

• 遺傳模型：如αA-晶狀體蛋白敲除小鼠（自發白內障）。

• 檢測指標：

• 裂隙燈檢查晶狀體混濁分級（LOCS III標準）、晶狀體透明度（光學相干斷層掃描，OCT）。

4. 視網膜疾病模型

（1）糖尿病視網膜病變（DR）模型

• 動物：大鼠（STZ誘導）、小鼠（Akita或db/db基因修飾）。

• 建模方法：

• 單次腹腔注射STZ（50–65 mg/kg，監測血糖>300 mg/dL）。

• 需維持高血糖3–6個月才能出現視網膜病變。

• 鏈脲佐菌素（STZ）誘導：

• 氧誘導視網膜病變（OIR）：新生小鼠暴露于高氧（75% O?，5天）后返回常氧（模擬早產兒視網膜病變）。

• 檢測指標：

• 視網膜血管滲漏（熒光素血管造影）、新生血管（視網膜鋪片PAS染色）、炎癥因子（VEGF、IL-6 ELISA）。

（2）年齡相關性黃斑變性（AMD）模型

• 動物：小鼠（C57BL/6）、豬（小型豬）。

• 建模方法：

• 氪激光（波長647 nm）破壞Bruch膜（3–5點/眼）。

• 7天后評估CNV面積（OCT或熒光素血管造影）。

• 激光誘導脈絡膜新生血管（CNV）：

• 遺傳模型：如補體因子H（CFH）敲除小鼠。

（3）視網膜色素變性（RP）模型

• 動物：rd1、rd10小鼠（自發PDE6B突變）。

• 檢測指標：

• 視網膜電圖（ERG）振幅下降、外核層厚度（OCT）、視桿細胞凋亡（TUNEL染色）。

二、眼科動物模型構建選擇要點

三、注意事項

1. 動物倫理：遵循國際實驗動物護理評估協會（AAALAC）指南，減少痛苦（如使用麻醉劑：異f烷或戊巴b妥鈉）。

2. 操作規范：

• 角膜操作需無菌條件，避免繼發感染。

• 玻璃體注射需使用微升注射器（33G針頭）。

3. 對照設計：設立假手術組（如僅做角膜刮擦無損傷）、空白對照組及陽性對照組（如已知有效藥物）。

4. 長期觀察：部分模型（如DR）需數月才能表型明顯，需定期監測（血糖、眼壓、眼底照相）。

5.